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 生物化学实验重点总结    
 文件大小: 146.34KB
 文件类型: PDF编辑 + RAR压缩
 发布日期: 2010-01-26
 适用年级: 临床医学专业大二上学期
 资料来源: 原创
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  生物化学实验重点总结 08级复习资料
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一、蛋白质的沉淀凝固反应
在水溶液中,蛋白质分子的表面由于形成水化层和双电层而使蛋白质成为稳定的胶体颗粒。在一定的物理化学因素影响下,蛋白质颗粒失去电荷,脱水,甚至变性,可以使蛋白质以固态形式从溶液中析出的过程。
这种反应可分为以下两种:
1. 可逆性沉淀反应:蛋白质虽已沉淀析出,但是它的分子内部结构并未发生显著变化,蛋白质仍然保持原有的性质,沉淀因素除去后,蛋白质能够再溶于原来的溶剂中。这种作用称为可逆性沉淀反应。
例如,盐析作用,以及在低温下乙醇对蛋白质的短时间作用,利用等电点的沉淀等。
沉淀蛋白质的常用方法:
等电点:当蛋白质溶液处于某一pH时,蛋白质解离成正、负离子的趋势相等,即成为兼性离子,净电荷为零,此时溶液的pH称为蛋白质的等电点。
二、氨基酸的纸层析 ★
层析:利用混合物在两种或两种以上的不同溶剂中的分配系数不同而使物质分离的方法。
用滤纸为支持物进行层析的方法,称为纸层析法,它是分配层析法的一种。滤纸可吸附有机溶剂中的水作为固定相,有机溶剂作为流动相。将样品点在滤纸上进行展层,由于它们各自的分配系数不同,故在流动相中移动速率不等,从而在两相之间发生分配现象。在固定相中分配趋势越大,随流动相移动速度越慢。
氨基酸经层析在滤纸上形成距原点不等的层析点,氨基酸在滤纸上的移动速率用Rf 表示
五、尿液淀粉酶活性测定——碘-淀粉比色法
淀粉在尿液淀粉酶作用下,37℃,30min,产生一系列水解物,用碘水检查淀粉水解的程度,找出不带蓝色色调且尿液稀释倍数最高的进行结果测定。(正常值为8-64活性单位)
酶的一个活性单位。
六、还原糖含量测定——比色法
单糖都是还原糖,蔗糖和淀粉是非还原糖。
3,5-二硝基水杨酸共热(沸水浴5min),3,5-二硝基水杨酸被还原为3-氨基-5-硝基水杨酸(棕红色物质),还原糖则被氧化成糖酸及其他产物。一定范围内,血糖:血液中的葡萄糖,正常值为3.89-6.11mol/L。
七、双缩脲法测蛋白质含量
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